产品概述

     本产品为1链cDNA反转录试剂盒。试剂盒中包含优化的5×gDNA去除预混液、RT enzyme mix及10×RT Buffer。其中的5×gDNA Remove Mix能有效清除RNA样本中残留的gDNA，从而保证后续PCR实验的特异性。而优化后的10×RT Buffer能够确保高效的第一链cDNA合成效率。试剂盒中包含的单组分逆转录引物Oligo(dT)20 VN和Random primers，方便用户可灵活选择进行后续实验。本试剂盒既可合成用于克隆等下游实验的全长cDNA(可达20 kb)，也可以合成高度均一的用于qPCR定量的cDNA。

产品特点&优势

1.引物灵活选择：可根据实验需求灵活选择Oligo(dT)20 VN或Random primers两种随机引物；

2.本试剂盒合成的cDNA可兼顾PCR和qPCR实验；

产品组成

操作流程

        PCR实验操作流程

              1. RNA变性

                  65℃孵育5 min，迅速置于冰上骤冷，并在冰上静置2 min。

              2. gDNA去除体系配制

                  移液枪轻柔吹打混匀，42℃孵育2 min。

             3.第一链cDNA合成反应液配制

         4.反应程序

                  *1：使用Random primers时需要此步骤；使用GSP或 Oligo(dT)20 VN时省略此步骤。

                  *2：对于富含复杂结构和高GC的模板，可将温度调整至50℃，有助于提高反转录效率和产量。

   后续实验为qPCR时操作流程

        1.gDNA去除体系配制

                   用移液枪轻柔吹打混匀。42℃孵育2 min。

       2.逆转录反应体系配制

                  用移液枪轻柔吹打混匀。

         3.反应程序

                 *1：对于富含复杂结构和高GC的模板，可将温度调整至50℃，有助于提高反转录效率和产量

保存条件

1. -30~-15℃保存，干冰/-20℃运输。

2. 10×RT Buffer中含有高浓度DTT，低温下可能有沉淀析出。使用前请还原至室温并轻摇混匀，待沉淀重新溶解后使用。